1、支原体培养：在孕妇阴道、宫颈管处用灭菌棉拭子取出分泌物进行支原体培养。常选用支原体肉汤(液体)培养基或支原体琼脂(固体)培养基，是最佳的确诊手段。
2、支原体DN***段检测：PCR检测(聚合酶链反应检测)支原体DNA，经PCR扩增DN***段，用于检测支原体。此法敏感性高，稳定可靠，快速简便，数小时得出结果，已成为临床快速确诊的重要实验手段。
3、尿道分泌物涂片检查：显微镜下高倍视野观察多形核白细胞数，可提示有感染，对疾病的诊断起到辅助作用。