1、生化检查：可发现血钠降低、血钾轻度升高、氯化物减低，空腹血糖大多降低。
2、血浆皮质醇测定：皮质醇是肾上腺皮质分泌的激素，皮质醇的分泌存在昼夜节律，因此只有晨起的皮质醇水平，对诊断肾上腺皮质功能减退有价值，若≤83nmol/L，一般可以确诊肾上腺皮质功能减退。
3、24小时尿17-羟皮质类固醇及17-酮类固醇：排出量明显低于正常，常受肝病、营养不良、慢性消耗性疾病影响，有肾功能不全者排出量亦减少，肥胖者或尿量多者可使排出量偏高。鉴于存在上述缺陷，该方法已逐渐被尿游离皮质醇取代。
4、24小时尿游离皮质醇：常低于正常低限，一般在55.2nmol以下。
5、血浆促肾上腺皮质激素测定：用于区分原发性和继发性肾上腺皮质功能减退原发者明显升高，继发者明显降低，接近于0。
6、促肾上腺皮质激素兴奋实验：给予一种人工合成的促肾上腺皮质激素类似物，可以刺激肾上腺皮质分泌激素，反应皮质储备功能。
7、影像学检查：结合所致者在肾上腺区X线射片及CT检查时可发现肾上腺增大及钙化阴影。转移性病变者易提示肾上腺增大，而自身免疫引起者肾上腺不增大。部分患者头颅MRI提示垂体增大，可能与促肾上腺皮质激素细胞增生有关。