1、实验室检查：血糖测定：患儿血糖一般低于2.8mmol/L，严重者可低于1mmol/L。
2、血液检查：当患者出现低血糖的同时，抽血化验血中同期胰岛素、C肽、甲状腺功能、生长激素、皮质醇、促肾上腺皮质激素、胰高糖素、胰岛素自身抗体、血乳酸、血氨、血氨基酸、酰基肉碱谱、游离脂肪酸、血酮体的含量，并进行尿有机酸谱及代谢产物分析。
3、功能试验：
（1）蛋白负荷试验：含1.5g/kg蛋白食物，不含碳水化合物饮食(鸡蛋、肉类、奶酪)，食入后，每半小时检测1次血糖、血浆胰岛素、血氨，共3h或血糖水平低于2.8mmol/L时停止。
（2）运动实验：心率=220-年龄值，运动时间10min以上，检测胰岛素、血糖、乳酸。取血时间运动前10min，运动后5min、10min、15min、20min、25min、30min、40min、50min、60min。
（3）饥饿诱发试验：头一天晚饭后开始禁食(可饮水)，次日晨起每2~3h化验血糖及胰岛素抵抗指数，一般于禁食24h内出现低血糖发作，当即化验血糖及胰岛素抵抗指数。采血后进食，终止试验。
4、影像学检查：通过胰腺增强CT检查可明确胰腺有无占位征象。F-左旋多巴-PET/SCAN显像技术可用以鉴别弥漫性和局灶性病变，为后续手术治疗提供参考。
5、遗传学检测：遗传学检测不仅可以发现致病基因突变以明确诊断，还有助于对钾离子通道相关基因突变、谷氨酸脱氢酶基因突变等类型进行鉴别，为临床诊断和治疗提供重要依据。