1、实验室检查：
（1）发作时血糖的测定：糖尿病人症状发作时，测血糖＜3.9mmol/L，即可确定合并低血糖。
（2）胰岛素/血糖比值：正常人空腹血糖低于2.2mmol/L时，胰岛素应低于5μU/mL，空腹血糖低于1.67mmol/L时胰岛素应停止分泌。随着血糖的下降，胰岛素与血糖的比值也降低，若比值＞0.3，应考虑为高胰岛素血症性低血糖症。同时测定胰岛素、胰岛素原和C肽，有助于鉴别内源性和外源性高胰岛素血症。
（3）血浆胰岛素(原)和C肽：空腹血糖＜2.5mmol/L，免疫发光法测得(真)胰岛素＞18pmol/L，C肽＞200pmol/L，胰岛素原＞5pmol/L，一般可确定为内源性高胰岛素血症，糖尿病人要考虑磺脲类和格列奈类药物等胰岛素，促分泌剂引起的低血糖症。若胰岛素升高，而胰岛素原和C肽正常或降低，提示外源性高胰岛素血症，考虑由胰岛素或胰岛素类似物所致。
（4）胰岛素抑制试验：可鉴别无症状性低血糖症或不稳定性或边缘性高胰岛素血症。正常人应用外源性胰岛素后，血浆C肽抑制约66%。但胰岛素瘤的患者在血糖正常时，血浆胰岛素和C肽不被抑制，而在低血糖症时，可抑制内源性胰岛素和C肽的分泌，其程度不及正常人。
2、影像学检查：影像学检查的目的主要是为筛查排除胰岛素瘤，常用的检查包括超声、CT、MRI等。