1、血钙测定：甲状旁腺功能亢进时，血钙水平可呈现持续性增高或波动性增高，少数患者的血钙值持续正常，建议必要时进行反复测定。
2、血磷测定：低磷血症是甲状旁腺功能亢进症的生化特征之一，如出现高磷血症常提示肾功能不全或高磷摄入。
3、血清碱性磷酸酶测定：高碱性磷酸酶血症是甲状旁腺功能亢进症的又一特征。血碱性磷酸酶增高往往提示存在骨骼病损。
4、尿钙测定：多数甲状旁腺功能亢进症的患者尿钙排泄增加。
5、血肌酐和尿素氮水平测定：测定血肌酐和尿素氮等肾功能，有助于原发性与继发性和三发性甲旁亢的鉴别。血肌酐和尿素氮水平升高也可见于甲状旁腺功能亢进症伴脱水或伴肾脏损害。
6、X线检查：约有40%以上的甲状旁腺功能亢进症患者的X线片可见骨骼异常改变。
7、骨显像检查：轻度甲状旁腺功能亢进症患者骨显像可以表现为正常，严重的甲状旁腺功能亢进症病例中，可以见到典型代谢性骨病的骨显像特征。
8、99mTc-MIBI双时相显像：甲状旁腺动态显像是用于甲状旁腺功能亢进症定位诊断的核医学功能影像技术。功能亢进的甲状旁腺肿瘤组织对于99mTc-MIBI的摄取明显高于正常甲状腺组织，而洗脱速度明显慢于周围的甲状腺组织。