1、血糖测定：一次或一次以上测定空腹或发作时血糖＜2.8mmol/L。
2、口服葡萄糖耐量试验：动态了解在糖负荷的情况下患者血糖和胰岛素的变化，对低血糖症的诊断及鉴别诊断有重大临床价值。
3、血浆胰岛素测定：正常空腹静脉血浆胰岛素浓度在5～20μU/ml，很少超过30μU/ml。胰岛素瘤患者胰岛素分泌呈自主性，其浓度常高于正常，可达160μU/ml。血糖及胰岛素需同时采血反复测定才有助于鉴别。
4、C肽测定：正常人空腹血清C肽为0.8～4.0ppg/ml，24小时尿C肽为(36±4)μU，用于协助诊断胰岛素瘤。
5、胰岛素释放试验：口服75g葡萄糖，各个时点取血后同时测血糖及胰岛素，胰岛素瘤患者血糖耐量呈扁平曲线，而胰岛素曲线相对较高且高峰＞150μU/L，分析结果时应除外早期2型糖尿病及肝病。