1、病原学检查：将可疑食物、呕吐物或排泄物加热煮沸20min后，接种血琼脂作厌氧菌培养，检出致病菌。
2、毒素试验：
（1）动物试验：将检查标本浸出液饲喂动物或腹腔内注射，如试验组动物发生肢体麻痹死亡，而对照组无，则本病的诊断即可成立。
（2）中和试验：将各型抗毒素血清注射到小白鼠腹腔内，随后接种标本，从而判断毒素和定型。
（3）禽眼接种试验：将含有毒素的浸出液注入家禽眼睑皮下，出现眼睑闭合，或出现麻痹性瘫痪和呼吸困难，经数十分钟至数小时死亡，可作为快速诊断。